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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
常温
- 规格:
500ml
产品简介:
在病理实验中针对骨组织或一些含钙组织制作切片时,由于硬度较大不能直接制作切片,需要脱去钙质使组织变软,方可制成切片。常用脱钙试剂有EDTA、有机酸、无机酸等,其中EDTA是一种较温和的螯合型脱钙剂,可与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH中性时可起螯合作用。其特点是对组织结构影响最小,可以较好保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化、原位杂交等检测,该法脱钙速度缓慢,脱钙周期长,一般需要数周至数月,与脱钙组织大小有关。
本产品EDTA脱钙液(慢脱),主要成分为0.5 M EDTA,pH 7.2 25℃。
保存条件:
常温保存,有效期一年。
使用方法:
取材后将组织置于足量的4%多聚甲全固定液中固定24 h以上,然后放入本脱钙液中,脱钙液的体积应为组织体积的15-20倍。脱钙期间每隔2-3天更换新鲜的脱钙液,直到组织变软,手触碰骨组织有弹性能轻易弯折时即判断为脱钙终点。EDTA脱钙温和,速度缓慢,不同组织所需脱钙时间不同,脱钙期间密切观察组织情况,避免脱钙过度损伤组织影响后续实验。
注意事项:
1. 请在通风良好处使用本产品,并做好防护,避免吸入。
2. 脱钙期间需密切关注组织脱钙情况,避免过度脱钙影响后续实验。
3. 本公司另提供快速脱钙液,脱钙速度快,可根据实验需要选择使用。
4. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。
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文献和实验本产品EDTA脱钙液(慢脱),主要成分为0.5 M EDTA,pH 7.2 25℃。
溶液对柱子进行清洗。(如果出现载量严重下降或者压力增加,需考虑彻底清洗) CIP(彻底清洗) 常规柱子(除了Ni excel)如出现反压严重升高或者柱子明显颜色改变,说明柱子需要进行彻底的清洗。 1. 脱镍: (1) 脱镍缓冲液:20mM 磷酸缓冲液,0.5M NaCl,50mM EDTA,pH 7.4。 (2) 使用5-10个柱体积的脱镍缓冲液冲洗柱子, (3) 然后再用5-10个柱体积的水冲洗柱子。 2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白:将柱子置换到1M NaOH中,室温1-2小时(若需
听到很多人抱怨,在免疫组化实际操作中遭遇过组织易脱片的问题,今天我将结合一些个人经验,与大家分享简单易操作的解决方法。方法一:使用防脱玻片,组织当然是越新越好。方法二:某些免疫组化染色时候,需要涉及多种抗原修复方法,如某实验需要双修复(热修复和酶修复),热修复相对来说是比较剧烈的(如放在 EDTA 中煮 1 min),沸腾的液体对组织还是有很大的冲击力的,此时组织容易脱,如果热修复放在酶修复后,则组织更容易脱,相反如果将不剧烈的酶修复放在热修复后,可以减少脱片的发生。但很多时候知道这些似乎解决
脱片产生的原因和如何防止脱片?(1)多聚赖氨酸玻片质量的问题。我原先是买的,迈新按说也是不错的,可是都脱成什么样子了。后面补做第二批时用的病理科老师自己做的片子,要好一点。(2)组织切的不好,切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀,或者切片者手法不好等。(3)组织的问题,我用的组织癌症的很多,越是癌症组织有坏死之类越容易脱。(4)没烤好,时间短温度不够之类。(5)操作的时候甩的太猛了,有脱片嫌疑的片子最好不甩或轻轻甩,用卫生纸从边缘上慢慢吸水。(6)修复的问题:抗原修复的时候高压时间
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