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室温,6个月
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现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
500ml
注意事项:无菌溶液。主要由硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸亚铁等组成,pH值为7.0,经高压灭菌处理。
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文献和实验相关专题 成功走出第一步:DNA提取 碱裂解法 大量提取质粒(500mL菌液) 1、取培养至对数生长后期(一般培养12~16小时)的含待提质粒的细菌 培养液于离心杯中,配平,4℃下4000rpm离心15min,弃上清,然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。 2、向盛有细菌 沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ,重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ,用干净的玻璃棒搅拌均匀后,再加剩下的部分)。
液,上下颠倒充分混合,7500×g,4 ℃,离心 5 min,回收上层水相;5. 加入 1/10 倍体积的 65 ℃ 预热 CTAB/NaCl 溶液,上下颠倒混匀;6. 用等体积的氯仿/异戊醇抽提,混匀,离心,回收上层水相;7. 加入 1 倍体积的 CTAB 沉淀液,上下颠倒混匀,如果沉淀可见,继续做步骤 8,也可于 65 ℃ 温育 30 min;8. 500×g,4 ℃,(或约 2700 rpm) 离心 5 min;9. 移出上清,用高盐 TE 缓冲液重悬沉淀 (按每克起始材料加 0.5~1 mL
或者 PBS 稀释,再用 200 目筛网,除去残留的组织块,并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次,过滤至无组织块为止,获得单细胞悬液。 收集细胞悬液,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网,用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用(浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板)。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网,用无菌眼科
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