- ￥180
- AMEKO
- 国产
- RC60901-2×50ml
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温运输，按要求保存，12个月有效。
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
2×50ml
注意事项：主要由酸化液、Alcian 染色液(PH2.5)组成。染色结果为：酸性黏蛋白呈蓝色,细胞核呈浅蓝色。
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文献和实验A280，计算出末被偶联蛋白的量，然后用100mL的蒸馏水洗，用50mL 0.1mol/L 甲酸-0.5mol/L 氯化钾，pH2.5甲酸混合液洗，最后用蒸馏水洗至约pH6.5即可。将凝胶转移至50mL小烧杯内，用30mL 0.5mol/L氯化钾—0.05mol/L氯化钙0.1mol/L、pH7.8Tris—HCL 缓冲液浸泡20分钟。脱气后装柱或置4℃冰箱保存。 (二) 胰蛋白酶粗操液的制备 取50g 猪新鲜胰脏(除去脂肪和结缔组织)剪碎置于高速组织捣碎机内，加入200mL
%，70%，50%，30%各5min。入PBS（含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3～7.4）10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 （3）50℃2×SSC，含5mmol/l EDTA溶液中30min。 （4）蛋白酶K（1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中，）37℃20～25min。 （5）0.2mol/l 甘氨酸液：室温10min，中止蛋白酶反应。 （6）4%多聚甲醛（PBS新鲜配制）：室温20
个/ml； 6. 在50ml离心管中加入浓度为1.037g/ml的Percoll溶液20ml，将细胞悬液加于Percoll溶液表面上，然后在20℃条件下离心（400g，10min）。用HA液混悬沉淀细胞，在4℃条件下离心（400g，10min），然后重复离心1次； 7. 用培养液混悬沉淀细胞，调整细胞密度至0.5×106 —2×106 个/ml，放37℃、5%CO2 的培养箱中培养。24h后换液，以后每周换液1次。
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