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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
100ml
注意事项:无菌溶液,主要由Tris、氯化镁组成。
储运及效期(运输/储存/有效期):室温,12个月
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文献和实验浓度不同,两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中,主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后,高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA,单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板(1ng/μL)(质粒 R-pGEX-4T-1,R 指代外源基因) 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2(5pmol/μL) 引物
1.塑料离心管:62.刻度离心管:13. 滴管:长: 1 吸酚:氯仿混合液中: 1 吸乙醇短(钝口) : 1吸DNA水溶液4.细玻棒:15.移液管:16.微量取样器17.手套:1副8.离心机9.紫外分光光度计10.37℃水浴,50℃水浴11.组织捣碎器12.电泳仪及电泳槽试剂1.裂解缓冲液:50mmol/l Tris—Hcl pH7.420mmol/lEDTA、0.5%SDS100mmol/l NaCl配法: 1mol/l Tris—HCl pH7.4 50ml 20%SDS 25ml 2mol
我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!
,使末端标记的互补单链寡核苷酸退火形成双链,保存于-20 ℃。 凝胶阻滞试验: 在结合缓冲液中加8 µl核蛋白,1µg poly (dI-dC)和100 fmol标记探针,反应总体积20 µl;在特异性竞争试验管中,则预先加入10 pmol冷探针(未标记的双链寡核苷酸),在非特异性竞争试管中预先加入10 pmol突变型双链寡核苷酸,混匀并室温放置30 min后再加入100 fmol标记探针。各反应管在室温中放置30min后,取反应液20µl上样,经5%非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳分离(150V,100
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