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室温运输,按要求保存,6个月有效。
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现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
2×500ml
注意事项:临用前等量混合后使用。
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文献和实验荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。2)去离子甲酰胺(DF):将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min,用Whatman l号滤纸滤。3)体积分数70%甲酰胺/2×SSC:35mL甲酰胺,5mL 20×SSC,10mL水。4)体积分数50%甲酰胺/2×SSC:100mL甲酰胺,20mL 20×SSC,80mL水。5)体积
,固定效果下降,建议尽早使用。 附:固定液用PBS的配制: 配法:按上述比例称取试剂,溶于DEPC水(也可用蒸馏水加DEPC)500~800ml中,过滤后,加水定容至1000ml,高压灭菌。通常配制成10×PBS的储备液,2×PBS和1×PBS可用DEPC水稀释获得。 除用DEPC水配制PFA外,也有用灭菌蒸馏水或经DEPC处理的0.01~0.1mol/L的PBS配制的,方法及注意事项同上。 4% PFA是目前原位杂交组织化学技术中最常
悬液标本,以1100 rpm.离心10 min沉淀细胞,换用适量体积的新鲜甲醇:冰乙醇(v/v)=3:1固定液重悬细胞并调整细胞密度,滴片,划出杂交区域,晾干;在预热到 37 ℃ 的2×SSC中老化30 min(也可实验前夜室温过夜老化再以2×SSC浸泡2分钟);依次于70 %、90 %和100 %的梯度乙醇中依次脱水,每缸2min,晾干(以下略作“梯度乙醇脱水后凉干”)。 2.2 RNase A消化 每张玻片上加30 μl 100 μg/ml RNA
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