碳青霉烯耐药基因KPC核酸检测试剂盒

产品名称：碳青霉烯耐药基因KPC核酸检测试剂盒
Name   ：Diagnostic Kit for Carbapenem-resistant KPC Gene
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒通过设计一对碳青霉烯酶耐药基因 KPC 的特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对产碳青霉烯酶耐药菌的 DNA 进行体外扩增检测， 用于对可疑感染者的病原学诊断。
技术参数
项目              参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        无菌采集患者病灶组织、痰液或脑脊液； 血液则抽取 3~5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。
保存和运输    上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：固体样本：手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；液体样本：直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；脑脊液直接取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；血液样本：取抗凝血下层血细胞 50μL， 加入 100μL 双蒸水吹匀。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
碳青霉烯类抗生素是抗菌谱最广的一类非典型 β-内酰胺类抗生素。但随着其广泛的应用导致耐药菌的出现，其中 KPC 基因为最常见的耐药基因，直接影响危重患者的预后，对临床救治提出严峻挑战。 本试剂盒适用于检测血液、脑脊液、痰液、病灶组织等样本中的碳青霉烯酶耐药基因 KPC，用于产碳青霉烯酶的耐药菌感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。