传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)核酸检测试剂盒

产品名称：传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)核酸检测试剂盒
Name   ： Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Disease Virus Detection Kit
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，根据传染性皮下和造血器官坏死病毒基因设计特异性引物和荧光探针，用荧光 PCR 技术对传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒的核酸进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学诊断。
技术参数
项目              参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        对虾样品按不同的大小或感染期取不同组织样品 0.1g 左右，其中，对虾幼体、仔虾取完整个体，3cm 以下的幼虾取摘除虾眼的头胸部，较大的幼虾可取腮区或数根腮丝，成虾取 1~2 根腮丝或自心脏或腹部血窦抽取血淋巴，怀疑为慢性感染的较大幼虾或成虾取淋巴器官。如果 2h 以后才能处理，宜将样本保存于无水乙醇中。非对虾的甲壳类动物参照对虾的方法取样。非生物样品，取 0.1~0.5g。
保存和运输     标本收集后可立即检测；若不能立即检测，可置于 2~8℃冰箱冷藏保存 7 天；如需长期保存，标本应冻存于 -70℃以下，但不能超过 6 个月，避免反复冻融。

操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：手术剪剪碎混匀后取 0.05g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
参考文献
[1]国家质量监督检验检疫总局. SN/T 1673-2005. 对虾传染性皮下和造血器官坏死病毒聚合酶链反应操作规程[S]
[2]王忠发, 王建跃, 卢亦, 等. 实时荧光定量 PCR 快速检测对虾 IHHNV 载量方法的建立和应用[J]. 中国卫生检验杂志, 2007.
传染性皮下和造血器官坏死病是由传染性皮下和造血器官坏死病毒（IHHNV）引起的。IHHNV 为线性单链DNA 病毒，是目前已知对虾病毒中最小的病毒。IHHNV 可感染大部分对虾，并且感染后可造成极高的死亡率或严重影响生长，使其畸形。目前没有有效的疫苗，也没有有效的治疗药物。OIE 将此病划为必须申报的甲壳类重要疾病之一。 本试剂盒适用于检测对虾不同组织样品等样本中的传染性对虾皮下和造血器官坏死病毒，用于传染性对虾   皮下和造血器官坏死病毒感染的辅助诊断。