货号 SCT-150-SS-W-S,AXYGEN,1.5ml

EASYspin 植物RNA快速提取试剂盒

。 d.  立刻接操作步骤项下3。 2. 液氮研磨法： a.  取500μl裂解液RLT(已经加入β-巯基乙醇)，转入1.5ml离心管中，加入50μl PLANTaid混匀备用。 b.  液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管, 立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。 在56℃温育1-3分钟有助于裂解植物,但是淀粉含量高的植物不能温育,因为提高的温度可能导致淀粉膨胀。 c.  用带钝针头的一次性 1 ml(配0.9mm针头) 注射器抽打

目的基因片段的PCR扩增与克隆

5ml管中， 迅速置于37℃摇床，150rpm，培养1小时。 8）取菌液50~100μl涂布在含氨苄青霉素、IPTG和X-Gal的LB平板上，37℃培养过夜，筛选转化子。注意要设空白，及质粒DNA对照。 （3）克隆片段的检测－1 1）在LB平板上挑取白色单菌落，置于2ml含氨苄青霉素的LB液体培养基中，37℃、200rpm振荡培养12-16小时； 2）4℃、12,000rpm离心30秒，收集细胞沉淀； 3）碱裂解法提取并纯化质粒DNA； ①将细菌沉淀，菌体重悬于100µl用冰

应用SDS提取法必须掌握的两个实验

，避免反复冻融DNA。 SDS裂解法提取大量质粒 本法的产量低得多，但却比其他方法更温和，是提取大质粒(大于15kb)的首选方法。 试验步骤： 1. 将500ml细菌沉淀物洗过后重悬于10ml用冰预冷的10%蔗糖、50mmol/L Tris.Cl(pH8.0)溶液中，将悬液移至30ml的带盖螺口塑料试管中。 2. 加入2ml新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml,溶于10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)]。当溶液的pH值小于8.0时