- ￥2813
- 罗氏Roche（KAPA）
- 09329838001（）
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
92
- 英文名：
KAPA UDI Primer Mixes (97-192)-G
- 供应商：
上海博耀商贸有限公司
- 规格：
96
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文献和实验相关专题 随着定量PCR 在不断改善，多重qPCR同样如此。多重qPCR是将几个PCR分析合在一起，同时扩增并独立检测目标，它在提高通量的同时也节省了样品。与单重qPCR相比，尽管它需要更多时间和精力，但用户得到了丰富的数据。 然而，多重qPCR 并不是单重反应的简单叠加，因为在一个反应管中，任何一个目标的扩增都能影响其他目标的扩增。让反应条件同时适合这么多个目标，这似乎不太容易，但使用qPCR预混液可能有帮助。预混
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
基因片段 经查询ALAS2基因的全长序列。应用Primer3.0软件设计第五外显子引物——上游引物：5’-ccataagtcaatgactgagc-3’，下游引物：5’-aagtggtgatagaacccaag-3’。在94℃3分钟，然后94℃30秒、56℃30秒、72℃1分钟共30个循环，72℃延伸5分钟条件下进行PCR反应。取0.5EP管，加入7ulPCR产物及3ulSSCP上样缓冲液，96℃变性10分钟。10%SSCP-聚丙酰胺凝胶及银染色。PCR产物交上海博亚公司直接测序。1.3.2
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