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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
KAPA EvoPrep Kit, PCR Free, 96 rxns
- 库存:
202409新品上市
- 供应商:
上海博耀商贸有限公司
- 规格:
96
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文献和实验1、变性温度和时间: 模板 DNA 和 PCR 产物的变性不充分是 PCR 失败的主要原因。适宜的变性条件是 95℃ 30s 或 97℃15s。变性不完全,DNA 双链会很快复性,因而减少产量。在变性中,温度太高或反应时间过长,会导致酶活性的损失。Taq DNA 聚合酶活性的半寿期:92.5℃为 2h 以上,95℃为 40min,97℃为 5min。 2、复性温度和时间: 复性温度决定 PCR 的特异性,而引物退火温度和所需时间长短取决于反应体系中的基本组成及扩增引物的长度和浓度,实际使用
in 96-well format" and "High-quality DNA for reliable multiplex PCR analysis" and table "High-quality RNA from tissues"), and without the need for additional RNase or DNase digestion (see figure "RNA with no genomic DNA contamination").
基因片段 经查询ALAS2基因的全长序列。应用Primer3.0软件设计第五外显子引物——上游引物:5’-ccataagtcaatgactgagc-3’,下游引物:5’-aagtggtgatagaacccaag-3’。在94℃3分钟,然后94℃30秒、56℃30秒、72℃1分钟共30个循环,72℃延伸5分钟条件下进行PCR反应。取0.5EP管,加入7ulPCR产物及3ulSSCP上样缓冲液,96℃变性10分钟。10%SSCP-聚丙酰胺凝胶及银染色。PCR产物交上海博亚公司直接测序。1.3.2
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