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- 罗氏Roche（KAPA）
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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
92
- 英文名：
KAPA HyperExplore MAX 3Mb T3， 12 rxn
- 供应商：
上海博耀商贸有限公司
- 规格：
12
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
3300 bps 大小的条带。8. 连接反应16 ℃ 过夜连接。敲除效率检测如果是敲人源细胞中的基因，我们可以在 293FT 细胞检测 系统的敲除效率，小鼠的细胞中的基因可以在 MEF 和 NIH3T3 中检测系统的敲除效率将上述 Px458M /Px459M-Guide RNA1 -Guide RNA2 转染进 293FT 细胞中 36 - 48 小时通过荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率提取转染细胞基因组，进行基因型鉴定。引物的设计方案如图 11 所示。图 12 显示敲除 PPM1A 基因。图
oligo dT的反转录反应(Qiagen)在费用、移液操作和可变性方面优于茎环结构的反转录。我们在384孔板上开展qPCR分析，每个处理组有四个样品和三次实验重复(总共12个孔)，以获得可靠、重复性好的结果。同时还包括无模板、无引物的对照。 2. Northern blotting：我们使用放射性标记的LNA寡核苷酸作为探针，进行miRNA的northern blot。许多miRNA在功能相关家族中发现，这些家族成员的种子序列为100%同源，只有3’端变化。因此，在使用qPCR
wangch84 各位高手，兄弟最近忙于质粒构建，意图将一段长约4000 bp的片段，通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下： 1. 通过LA Taq酶扩增，并纯化回收目的片段（引物中带有酶切位点，保护性碱基＝3，上游带有Kozak序列）；由于回收效率很高，所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段，H2O 20 μl，10 X K BUFFER 4 μl，两种酶各2 μl，37℃作用过夜（12-14 h
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