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92
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KAPA HyperExplore MAX 3Mb T2, 12 rxn
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上海博耀商贸有限公司
- 规格:
12
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文献和实验oligo dT的反转录反应(Qiagen)在费用、移液操作和可变性方面优于茎环结构的反转录。我们在384孔板上开展qPCR分析,每个处理组有四个样品和三次实验重复(总共12个孔),以获得可靠、重复性好的结果。同时还包括无模板、无引物的对照。 2. Northern blotting:我们使用放射性标记的LNA寡核苷酸作为探针,进行miRNA的northern blot。许多miRNA在功能相关家族中发现,这些家族成员的种子序列为100%同源,只有3’端变化。因此,在使用qPCR
wangch84 各位高手,兄弟最近忙于质粒构建,意图将一段长约4000 bp的片段,通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下: 1. 通过LA Taq酶扩增,并纯化回收目的片段(引物中带有酶切位点,保护性碱基=3,上游带有Kozak序列);由于回收效率很高,所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段,H2O 20 μl,10 X K BUFFER 4 μl,两种酶各2 μl,37℃作用过夜(12-14 h
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
重要,两个方向都可以选择。图 7 Guide RNA 设计流程选择一对 Guide RNA 来敲除基因敲除基因组一段序列,选择一对 Guide RNA 就显得非常重要。根据前人的实验,敲除基因 1Mb 并没什么问题。我们一般建议敲除 10Kb 以下。 选择一对 Guide RNA 的标准如下, ( 图 8 and 图 9 是两个实例)如果目的基因比较短,在 10kb 左右 ,建议敲除全基因,甚至包括启动子。如果目的基因比较长,建议敲除比较重要的外显子。目的基因比较长,也可以敲除全部的启动子和部分的基因
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