KAPA HyperExplore 非人类序列捕获探针0.5

miRNA专家谈之二：如何绘制并验证表达谱

oligo dT的反转录反应(Qiagen)在费用、移液操作和可变性方面优于茎环结构的反转录。我们在384孔板上开展qPCR分析，每个处理组有四个样品和三次实验重复(总共12个孔)，以获得可靠、重复性好的结果。同时还包括无模板、无引物的对照。 2. Northern blotting：我们使用放射性标记的LNA寡核苷酸作为探针，进行miRNA的northern blot。许多miRNA在功能相关家族中发现，这些家族成员的种子序列为100%同源，只有3’端变化。因此，在使用qPCR

【求助】4 kb片段连接pcDNA3.1+的问题

wangch84 各位高手，兄弟最近忙于质粒构建，意图将一段长约4000 bp的片段，通过BamH1和EcoR1两个酶切位点连接到pcDNA3.1+载体上。情况如下： 1. 通过LA Taq酶扩增，并纯化回收目的片段（引物中带有酶切位点，保护性碱基＝3，上游带有Kozak序列）；由于回收效率很高，所以在进行下一步双酶切时只加了12 μl的目的片段，H2O 20 μl，10 X K BUFFER 4 μl，两种酶各2 μl，37℃作用过夜（12-14 h

沙眼衣原体诊断研究进展

荧光显微镜观察。Thomas等[5]用不同方法测定宫颈拭子标本中的CT，EIA可检出稀释至10-5～10-6的原体（elementary body,EB）；而DFA对稀释至10-8后的EB仍可阳性，敏感性较EIA为高。 　　核酸扩增技术 　　近年来，随着分子生物学的发展，核酸扩增技术在常规感染的诊断中很快建立。这些技术主要有扩增探针（Ampliprobe）、聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、核酸自身连续序列复制技术（NASBA）和Q-B复制酶试验。