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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
360
- 英文名:
Diagnostic Kit for Influenza B virus RNA
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T
Name : Diagnostic Kit for Influenza B virus RNA
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒用一对乙型流感病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对乙型流感病毒 RNA 进行体外扩增检测,用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
技术参数
项目 参数详情
检测方法 荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD(可选)
保存条件 -20℃避光保存,有效期12个月,避免反复冻融(≤5次)
适用仪器 ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型 咽拭子:应使用专用采样拭子,适度拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将拭子放入标本采集管中,旋紧管盖并密封,以防干燥。全血:疑似感染者的静脉血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管,8000rpm 离心 2min,取适量上清液于 1.5mL 灭菌离心管中。
保存和运输 上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输, 严禁反复冻融。
操作流程(以荧光PCR为例)
1. 样本处理:取适量样本于 1.5mL 灭菌离心管中,按 RNA 提取试剂盒说明书进行提取。
2. 试剂配制:加入预混反应液、酶及模板,离心混匀。
3. 扩增检测:运行预设程序(如:95℃预变性10min,94℃ 15s→55℃ 30s,40循环),分析Ct值。
结果判读
阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35
- 严格质控标准:每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证。
- 配套服务:提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
质控标准 阴性质控品:Ct>38 或无 Ct 值显示; 阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
应用案例
- 科研机构研究
检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
3. 阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
5. 不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;
6. 试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
7. 本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行;
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
本试剂盒适用于检测的咽拭子、血清和痰等标本中乙型流感病毒 RNA,适用于乙型流感病毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
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文献和实验法大致一样,只是是否加PBS的差异。加PBS,这样使得血清在煮10分钟后,不会干掉,没有上清,另外,它不会干扰核酸的提取。加TE是否也可以呢? 二 裂解液煮沸法 郭龙华等《3种方法从血清标本中提取I--IBV DNA 的比较》 比较3种从血清标本中提取HBV DNA方法的效果,选出一种快速、简单、高效提取血清中HBV DNA的方法——裂解液煮沸法,此法提取的HBV DNA模板含量最高,与碱裂解法和蛋白酶K-苯酚抽提法之间的差异显著 (P 裂解液配制 (10 mmol/L Tris—HC1,1 mmol/L
简称流感病毒。流感的病原体,呈球形,直径80~120毫微米,核酸为单链RNA,有包膜,包膜上有血凝素和神经氨酸酶。流感病毒有甲型、乙型和丙型之分,存在于病人的口、鼻等分泌物中,经飞沫传播,进入人体呼吸道粘膜上皮细胞,并在细胞内繁殖,引起粘膜充血、水肿、细胞变性、脱落等局部病变。经1~3天潜伏期,出现全身中毒症状,如发热、发冷、头痛、鼻塞、流递、咳嗽、全身肌肉疼痛等现象。一般病程3~7天。流感病毒引起的急性呼吸道传染病具有很强的传染性,发病率高,甚至可引起世界大流行。
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