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基因编辑再次升级!领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具,可安全高效进行体内基因编辑
选获得 v3.4 BE-eVLPs 系统。 最后,研究人员发现,不同包装质粒间的化学计量比也会影响 BE-eVLP 系统的编辑效果。为了调节这种化学计量学,他们改变了 gag-3xNES-ABE8e 与转染 VLP 的野生型 MMLV gag-pro-pol 质粒的比例。结果发现 gag-pro-pol 质粒与 gag-3XNES-ABE8e 质粒的摩尔比例为 1:3 时获得最佳的碱基编辑效率,并命名为第四代 BE-eVLPs 系统(v4 BE-eVLPs)。 随后的实验也证明,v
值,若OD260 /OD280 > 2. 0,表明DNA 中含有RNA杂质。若OD260 /OD280 1. 2. 3 质粒DNA单酶切后的电泳检测[ 2 ] 分别取四种方法得到的质粒DNA 1μl,进行酶切。反应体系为20μl,在0. 5ml Eppendorf管中依次加入ddH2O,10 ×酶切反应缓冲液, BSA, 1μg质粒DNA,限制性内切酶Sma Ⅰ0. 5μl, 于37℃酶切2h, 加适当loadingbuffer混匀上样, 在0. 8%琼脂糖凝胶上电泳,采用5V / cm的电压
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-1 2、靶向E2F8通过破坏RRM2驱动的DNA修复增敏吉西他滨耐药的胆囊癌对PARP抑制剂的疗效 发表期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 研究机构:复旦大学附属中山医院 研究人员在吉西他滨耐药的NOZ-R胆囊癌细胞中进行了全基因组CRISPR ko筛选(GeCKO v2文库)。敲除转录因子E2F8可显著增强耐药细胞对PARP抑制剂奥拉帕尼的敏感性。机制上,E2F8通过转录上调RRM
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