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- 烜雅生物
- XY-PCR309C
- 国产
- 2026年01月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
200
- 英文名：
Borrelia burgdorferi Detection Kit
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
【产品名称】
通用名称：伯氏疏螺旋体（BB）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
Name ：Borrelia burgdorferi Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
【预期用途】 伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)是莱姆病(Lyme disease)的病原体,是一种经蜱叮咬传播而引起的自然疫源性人兽共患病,多种小型野生哺乳动物及鸟类为其保存宿主。该病在世界上分布广泛，1992 年,世界卫生组织(WTO)将此病列为重点防控对象。该病早期症状以皮肤慢性游走性红斑为特点，以后出现神经、心脏或关节病变。 本试剂盒适用于检测全血、皮肤病灶等样本中的伯氏疏螺旋体，用于伯氏疏螺旋体感染的辅助诊断。
【检验原理】 本试剂盒对伯氏疏螺旋体基因设计特异性引物和荧光探针，用荧光 PCR 技术对伯氏疏螺旋体的核酸进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
【试剂组成】
注： 1） 不同批号试剂不能混用。 2） 试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】 -20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】 ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】 用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管；皮肤病料
【保存和运输】 上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样本前处理 取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀；皮肤病料取 1g 研磨。
1.2 核酸提取 推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提 取，请按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21μL/管。
3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。
4. PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3 推荐循环参数设置：
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定 设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 可疑：检测通道 3538 或无 Ct 值。
6. 质控标准 阴性质控品：Ct 值>38 或无 Ct 值； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7. 检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
伯氏疏螺旋体（BB）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）相关产品：
通用名称：伯氏疏螺旋体（BB）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
Name ：Borrelia burgdorferi Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
【预期用途】 伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)是莱姆病(Lyme disease)的病原体,是一种经蜱叮咬传播而引起的自然疫源性人兽共患病,多种小型野生哺乳动物及鸟类为其保存宿主。该病在世界上分布广泛，1992 年,世界卫生组织(WTO)将此病列为重点防控对象。该病早期症状以皮肤慢性游走性红斑为特点，以后出现神经、心脏或关节病变。 本试剂盒适用于检测全血、皮肤病灶等样本中的伯氏疏螺旋体，用于伯氏疏螺旋体感染的辅助诊断。
【检验原理】 本试剂盒对伯氏疏螺旋体基因设计特异性引物和荧光探针，用荧光 PCR 技术对伯氏疏螺旋体的核酸进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
【试剂组成】
| 包装规格 | 50T/盒 |
| BB 反应液 | 500μL×2 管 |
| 酶液 | 50μL×1 管 |
| BB 阳性质控品 | 50μL ×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
【储存条件及有效期】 -20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】 ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】 用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管；皮肤病料
【保存和运输】 上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样本前处理 取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀；皮肤病料取 1g 研磨。
1.2 核酸提取 推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提 取，请按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | BB 反应液 | 酶液 |
| 用量（样本数为 N） | 20μL | 1μL |
3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。
4. PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3 推荐循环参数设置：
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
| 2 | 40 cycle | 94℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 是 |
5.1 结果分析条件设定 设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 可疑：检测通道 35
6. 质控标准 阴性质控品：Ct 值>38 或无 Ct 值； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7. 检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验该产品被引用文献
[1] 国家质量监督检验检疫总局. SN/T4399-2015 国境口岸伯氏疏螺旋体实时荧光 PCR 检测方法[S]. 北京：科学出版社, 2015. [2] 蔡婧. 伯氏疏螺旋体分型多重实时荧光定量 PCR 检测方法的建立与初步应用[J]. 承德医学院, 2015. [3] 郝琴. 中国莱姆病螺旋体的遗传多态性研究及全基因组序列初步分析[J]. 中国疾病预防控制中心, 2010.
文献支持
伯氏疏螺旋体（BB）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
￥2380
