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- 烜雅生物
- XY-PCR304C
- 国产
- 2026年03月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
188
- 英文名：
Yersinia Pestis Detection Kit
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
【产品名称】
通用名称：鼠疫杆菌（YP-CA）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
Name ：Yersinia Pestis Detection Kit （Real-Time PCR Method）
【包装规格】50T/盒
【预期用途】 鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia Pestis, YP）,简称鼠疫杆菌，引起危害人类健康的烈性传染病之一，具有传染性强、传播迅速、疫情严重、死亡率高等特点，为国际检疫传染病。 本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的鼠疫杆菌，用于鼠疫杆菌的辅助诊断。
【检验原理】 本试剂盒采对鼠疫杆菌基因设计特异性的引物和探针，用荧光 PCR 技术对鼠疫杆菌的核酸进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
【试剂组成】
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】 -20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】 ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】 患病动物：腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人：痰；尿液、血液
【保存和运输】 上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样本前处理 组织样品：称取组织样品约 0.5g，置于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，匀浆后取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中； 痰、尿液等液体样品：取 100μL 于灭菌离心管中； 血液样品：取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀。
1.2 核酸提取 推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取试剂（离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N（N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表：
将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21μL/管。
3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3 推荐循环参数设置：
5. 结果分析判定
5.1 结果分析条件设定 设置Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline 的start 值（一般可在 3~15 范围内调节）、stop 值（一般可在 5~20 范围内调节），以及 Threshold的Value 值（上下拖动阈值线至高于阴性对照），重新分析结果。
5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 可疑：检测通道 3538 或无 Ct 值。
6. 质控标准 阴性质控品：Ct>38 或无 Ct 值显示； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7. 检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
鼠疫杆菌（YP-CA）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）相关产品：
通用名称：鼠疫杆菌（YP-CA）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
Name ：Yersinia Pestis Detection Kit （Real-Time PCR Method）
【包装规格】50T/盒
【预期用途】 鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia Pestis, YP）,简称鼠疫杆菌，引起危害人类健康的烈性传染病之一，具有传染性强、传播迅速、疫情严重、死亡率高等特点，为国际检疫传染病。 本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的鼠疫杆菌，用于鼠疫杆菌的辅助诊断。
【检验原理】 本试剂盒采对鼠疫杆菌基因设计特异性的引物和探针，用荧光 PCR 技术对鼠疫杆菌的核酸进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染者的病原学检测。
【试剂组成】
| 包装规格 | 50T/盒 |
| YP-CA 反应液 | 500μL×2 管 |
| 酶液 | 50μL×1 管 |
| YP-CA 阳性质控品 | 50μL ×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
【储存条件及有效期】 -20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】 ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】 患病动物：腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人：痰；尿液、血液
【保存和运输】 上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样本前处理 组织样品：称取组织样品约 0.5g，置于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，匀浆后取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中； 痰、尿液等液体样品：取 100μL 于灭菌离心管中； 血液样品：取抗凝血下层血细胞 50μL，加入 100μL 双蒸水吹匀。
1.2 核酸提取 推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取试剂（离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N（N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | YP-CA 反应液 | 酶液 |
| 用量（样本数为 N） | 20μL | 1μL |
3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。
4.3 推荐循环参数设置：
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
| 2 | 40 cycle | 94℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 是 |
5.1 结果分析条件设定 设置Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline 的start 值（一般可在 3~15 范围内调节）、stop 值（一般可在 5~20 范围内调节），以及 Threshold的Value 值（上下拖动阈值线至高于阴性对照），重新分析结果。
5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 可疑：检测通道 35
6. 质控标准 阴性质控品：Ct>38 或无 Ct 值显示； 阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7. 检测方法的局限性
1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
鼠疫杆菌（YP-CA）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）相关产品：
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| Human Papillomavirus 33(HPV-33)人乳头瘤病毒33 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 18(HPV-18)人乳头瘤病毒18 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 16(HPV-16)人乳头瘤病毒16 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 14(HPV-14)人乳头瘤病毒14 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 13(HPV-13)人乳头瘤病毒13 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 12(HPV-12)人乳头瘤病毒12 探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| Human Papillomavirus 11(HPV-11)人乳头瘤病毒11探针法荧光定量PCR试剂盒 |
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文献和实验该产品被引用文献
[1] 国家质量监督检验检疫总局.SN/T 1280-2003 国境口岸鼠疫检验规程[S].北京:科学出版社, 2003. [2] 张志凯, 海荣, 蔡虹, 等. 鼠疫-耶尔森菌的多重 PCR 检测方法[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2007. [3] 吉林省质量技术监督局. DB22/T 2081-2014 鼠疫-耶尔森菌核酸的测定-荧光 PCR 方法[S].
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鼠疫杆菌（YP-CA）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）
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