HandyPlate®环境李斯特氏菌测试片

产品名称：环境李斯特氏菌测试片
英文名称：Handy plate® Environmental Listeria Detection Plate

产品编号与包装规格：

产品简介：HandyPlate® 环境李斯特氏菌测试片为预制备的即用型培养基产品，含有标准的培养基、冷水凝胶和显色指示剂。本产品可用于食品和环境样品中李斯特氏菌的快速计数，包括单核细胞增生李斯特菌 (L. monocytogenes)、英诺克李斯特氏菌 (L. innocua) 和威尔氏李斯特菌(L. welshimeri)。

环凯 HandyPlate®环境李斯特氏菌测试片 使用说明：

1，定性检验
      1.1 以无菌操作取样品25g(mL)加入到含有225mL LB1肉汤增菌液的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1min~2min，于30 ℃±1 ℃培养24h±2h。移取0.1mL，转种于10mL LB2肉汤 二次增菌液内，于30 ℃± 1 ℃ 培养24h±2h。
      1.2 揭开测试片上膜，用接种环取LB2 二次增菌液划线接种于环境李斯特氏菌测试片上，再加入1mL无菌生理盐水于测试片上，盖上上膜，将测试片正面向上水平放置 36 ℃±1 ℃培养 24h±2h。

定性检验操作图解

2，定量检验

      环境样品：无菌使用采样棒、预先润湿的海绵或其他采样装置来收集环境样品，至无菌磷酸盐缓冲溶液或无菌生理盐水中(≤10mL)，润湿试剂可以是无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液；混合均质成样品匀液后，用1mL无菌吸管或移液器吸取匀液1 mL，注入含有9 mL稀释液的试管内，振摇后成为1:10的样品匀液，以此类推，制备10倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管或移液枪头。

      食品样品：取样品 25 g(mL) 放入含有225 mL无菌磷酸盐缓冲液（或无菌生理盐水）的无菌均质杯或均质袋内，均质器混匀1 min～2 min 制成1:10的样品匀液，必要时用无菌1 mol/L NaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.8～7.2。用1mL无菌吸管或移液器吸取1:10均液1 mL，注入含有9 mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液，以此类推，制备10倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管。

      根据对样品污染状况的估计，选择2～3个稀释度进行检测。将环境李斯特氏菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，排除多余空气，边缘少量气泡不影响观察结果。

定量检验操作图解

3，培养：将测试片正面向上水平放置36℃±1℃，培养24h±2h，若有需要可适当延长培养时间。

4，判读：计数所有蓝绿色菌落，合适的计数范围在30 CFU～300 CFU。若整个培养区域呈淡绿色，可能是菌浓度过高，需对样品进一步稀释以获得确切的计数。如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种针将菌落挑出使用即可。

储存条件与保质期：2~8℃密封储存，有效期为18个月（已打开包装未使用的测试片装回包装袋中，折叠后用不干胶贴密封，储存时间不超过4周为宜）。

废弃物处置：测试片在使用之后可能包含微生物，需在121℃ 30min高压蒸汽灭菌处理后严格遵守按规定的方式处理。