Q30强阴离子交换预装柱，i-Quip™, 容积:5ml;柱

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点，「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷，能够加速大家的纯化之路，由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一：凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因：缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞；流速过快、流动相粘度（如乙醇等）过高、温度过低。 建议处理方法：首先卸柱子，确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了：参考说明书 CIP 操作进行清洁；更换层析柱顶端滤膜

膜蛋白纯化攻略分享

本身不带标签，则需要使用离子交换层析。 离子交换层析 离子交换层析推荐使用 RESOURCE 和 Capto HiRes 系列，能得到比较好的分辨率。不过要注意阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂，阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂，以免影响层析柱载量。 离子交换之前需降低缓冲液中盐浓度，由于膜蛋白的特殊性，推荐使用脱盐柱进行此步骤，根据样品体积可选择 HiTrap Desalting 5 mL 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 mL 两种常用柱型。最终上样体积不要超过

多糖纯化，方法对了也可以带点甜~

生物中过敏源多糖的纯化 样品前处理：海洋软体动物肉拨出洗净搅碎。 粗提：酶法处理并用 Sevage 法脱去大量的蛋白质。 层析纯化： 使用凝胶过滤层析进行初步分离，本例中使用的是 Sephacryl S-300，分离范围为 10KDa-1500KDa。可去除分子量差异较大的蛋白或核酸杂质，不同聚合度的多糖分子也可以得到有效分离。 选择 Capto Q 阴离子交换层析作为精细分离。多糖分子带有负电，因此选择高流速高载量的 Capto 系列阴离子交换填料分离效果更佳