PI4KIIIbeta-IN-10，1881233-39-1

【求助】信号通路抑制剂的配制和使用请教

dentist昭安 我刚买了几个信号通路的特异性抑制剂，分别是NF-кB(PDTC)、PI3K/Akt (LY294002）、 p38 MAPK (SB203580) ； 看说明书，PDTC的分子量是164.29，PDTC可溶于水(1mg/ml)，在DMSO中的溶解度可达到100mM； LY294002 的分子量是307.3，1mg用DMSO配制，浓度为10mg/ml，共0.1ml ；SB203580 的分子量是377.43，1mg用DMSO配制，浓度

流式细胞分析分选术

摇晃，使DNA 分布均匀，转染5 小时后， 换置培养液(10%FBS+DMEM)。 2.3 细胞分板 细胞分板：转染12-16 小时后, 根据细胞密度按1：3 或1：2 分板，使分 板后细胞密度为30%左右,37℃继续培养30h。 2.4 加药刺激 除了利用转染质粒作为阳性对照，也可使用药物处理细胞作为阳性对照样本 细胞铺板24 小时后，加药刺激： G1，S-arrest ：L-mimosine: 0.5mM 5-fluorourcil: 10mM G2/M

细胞培养方法的问答（1）

。当然7-AAD会优于PI，因为PI的细胞毒性会更大，而且在流式上的图形也不会像7-AAD漂亮。可以试试。12、受试物的浓度和水溶性问题： 问：向大家请教受试物的问题： (1)我采用是大鼠睾丸支持细胞，染毒的物质是有机磷农药，不溶于水。请问应采用什么样的有机溶剂作为溶剂，要注意什么？ (2)如何确定有机磷农药的染毒浓度？ 答：可以试试DMSO，千分之一体积，不会影响细胞。eg.需要10uM的药液，用DMSO将药配成10mM的储备液，用的时候1000倍稀释。 13、血液中提取单核细胞后的保存问题