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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃储存
- 英文名:
SBI-115
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
882366-16-7
- 规格:
S426669-1ml
英文名:SBI-115
纯度或规格:10mM in DMSO
SPU:S426669
CAS:882366-16-7
存储温度:-80℃储存
运输条件:特低温运输
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文献和实验杯中加入 800ul SOC培养基,冲洗出菌体,转移至灭菌1.5 ml EP管中。37℃,150 rpm ,轻摇45~60 min。 取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml 的LLB-Zeocin平板上,正放,待涂布液不在流动,37℃ 培养12~16小时。 (2)线性化质粒DNA对Pichia pastorisGS115的转化 取新鲜制备的(或-70℃冻存的)感受态细胞置于冰浴中,使其完全解冻; 1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中,加入5-20μg线性化质粒(5~
酵母PEG1000转化法 (1)试剂 缓冲液A:1.0M Sorbitol,10mM Bicine,pH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol 缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma),0.2M Bicine,pH8.35 缓冲液C:0.15M NaCl,10mM Bicine,pH8.35 未污染的新鲜、试剂级DMSO,-70℃保存 注: 缓冲液A、B、C均用滤膜过滤,-20
,然后转入95.0ml SD/-Ura液体培养基中,30℃恒温,250rpm振荡培养16-18hr,至OD600>1.0。 SD/-Ura液体培养基,115℃,10lb/in2灭菌15min A. Difco Nitrogen 0.67g B. 葡萄糖 2.00g C. 10×DO(-His,-Leu,-Trp,-Ura) 10.0ml D. 20×His 5.0ml E. 20×Leu 5.0ml F. 20×Trp
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