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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
PEG Biotin, mPEG-Biotin
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
P164160-500mg/P164160-100mg
| 规格: | P164160-500mg | 产品价格: | ¥720.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | P164160-100mg | 产品价格: | ¥157.9 |
Biotin functionalized polyethylene glycol (PEG-Biotin) is an avidin or streptavidin binding PEG derivative that is used to biotinylate biomolecules or other material surfaces. Biotin can be easily detected by biotin/streptavidin binding assay and is widely used for molecule target detection.
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文献和实验值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下: (1)根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。 (2)在电磁搅拌下,将蛋白质溶液加入胶体金溶液中(pH已调至PI超过0.5pH),加入蛋白质时应逐滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。 (3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEG MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记胶体金,放在4℃达2年半仍然保持良好性能,而用PEG
肽片段。混合的样品用抗生物素蛋白亲和层析法分离。这些肽段还可以进一步通过反向毛细管液相色谱和MALDI-TOF或QTOF2质谱进行分析,质谱后得到的相差8Da 的同位素分子质量峰,这些峰的比率可以作为与原样品各个蛋白相关量的测量尺度, 如一对峰相差8 个质量数,则为同一种蛋白质, 由D0和D8 峰的相对强度进行相对定量。由于ICAT在化学结构上相同且在分子量上只相差8 个中子,所以在用MS 检测时相对量的可信性有所提高。同样的, LC-ESI-MS 也可根据重和轻肽段的相对量提供蛋白的定量信息
滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。 (3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEg MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记胶体金,放在4 ℃ 达2年半仍然保持良好性能,而用PEG稳定的标记胶体金放在4℃1年左右就有分层现象,而且染色效果显著下降。因此,我们认为最好还是用BSA作稳定剂。 (4)将标记好的胶体金装入透析
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