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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光,-20°C储存;超低温运输
- 英文名:
Cy5 PEG Biotin
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
C163501-5mg/C163501-25mg
| 规格: | C163501-5mg | 产品价格: | ¥907.90 |
|---|---|---|---|
| 规格: | C163501-25mg | 产品价格: | ¥2779.90 |
中文名:Cy5 PEG 生物素
英文名:Cy5 PEG Biotin
纯度:MW 5000 Da
货号:C163501
存储温度:避光,-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验我收集的几个Northern杂交protocol(同位素,DIG,生物素等),供大家参考!
0.25mg/L PEG (3500~8000均可,在缓冲液中加入2%~3% 的PEG可提高平端连接效率)。 无菌蒸馏水(SDW) 试验程序 1. 建立以下反应体系(终体积20μl): 4μl 质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2. 反应管置于15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应
项技术称为同位素标记的亲和标签(isotope-coded affinitytag,ICAT),该技术是用化学试剂来修饰半胱氨酸残基的巯基基团(Gygi等,1999;Han等,2001)。这个化学试剂由三个区域组成:一个加到巯基基团上的终端碘尾巴;一个不是用d0 就是用d8 (d为氘,因而给予的两组不同标记的蛋白质在分子质量上有8Da的差别)标记的中间区域或连接区域;一个是同位素捕获的末端,这个末端包含了一个生物素钓饵。两个被标记的样品(不论是用轻试剂标记的还是用重试剂标记的)按1:1的比例混合
+ 0.04 A280 /A260 =0.67+ 0.03 A290 /A260 =0.28+ 0.03 dTTP pH 7.5 A250 /A260 =0.65+ 0.03 A280 /A260 =0.73+ 0.03 Concentration: Mw Am pH E k (for 1:5000) dATP
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