4-甲基硫代苯甲酰胺，2362-62-1，10mM in D

分子杂交技术（四）

-DNA杂交通常要在高温反应条件下进行,其反应的最大速度是在低于Tm值约25℃。然而对于那些反应时间需要延长,或对生物活性必须保护的复杂生物的核酸研究(如哺乳动物),核酸长时间处于高温下很显然是不利的。这会引起核酸链的断裂、胶嘌呤的作用，结合到膜上的DNA脱落也会增多。这个问题可以通过使用高浓度盐溶液（如6.2mol/l NaCl），或使用某些有机溶剂的水溶液降低反应温度来解决。常使用的有机溶剂有两类，甲酰胺和二甲亚砜（DMSO）。在杂交液中加入30%二甲亚砜可使T2噬菌体DNA的Tm值比原先降低14

细胞培养完整手册

钢滤器和支架连接好。然后卸下支架腿分别用布包好待消毒。 3.抽滤：配制好的培养液通常用滤器过滤除菌。通常用蔡式滤器在超净工作台内过滤。 4.分装：将过滤好的培养液分装入小瓶内置于 4℃ 冰箱内待用。 5.使用前要向 100ml 培养液中加入 1ml 谷氨酰胺溶液（ 4℃ 时两周有效）。 六、血清： 1.血清的灭火：细胞培养常用的是小牛血清，新买来的血清要在 56℃ 水浴中灭火 30 分钟后，再经过抽滤方可加入培养基中使用。 血清必须贮存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，请勿

细胞培养方法的问答（1）

。当然7-AAD会优于PI，因为PI的细胞毒性会更大，而且在流式上的图形也不会像7-AAD漂亮。可以试试。12、受试物的浓度和水溶性问题： 问：向大家请教受试物的问题： (1)我采用是大鼠睾丸支持细胞，染毒的物质是有机磷农药，不溶于水。请问应采用什么样的有机溶剂作为溶剂，要注意什么？ (2)如何确定有机磷农药的染毒浓度？ 答：可以试试DMSO，千分之一体积，不会影响细胞。eg.需要10uM的药液，用DMSO将药配成10mM的储备液，用的时候1000倍稀释。 13、血液中提取单核细胞后的保存问题