Annealing Buffer for RNA Oligo

产品介绍：

阿拉丁生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，即RNA寡核苷酸退火缓冲液，是一种经过我们多次实验证实、可以用于RNAoligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNAoligo可以用该退火缓冲液进行退火，以形成双链RNA。使用阿拉丁生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，可以有效避免RNA oligo自身形成发夹结构，有利于退火的正确进行。使用本试剂盒操作非常简单，只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后，置于PCR仪上，约60分钟即可完成。Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)经过特殊处理，不含RNase，可避免RNA的降解。如果一次退火反应体积为100微升，一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。

注意事项：

Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)只适合于RNA oligo的退火，不适合用于DNA oligo 的退火。由于RNA非常容易被降解，一定要严格遵守RNA的操作规范，防止RNase污染。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1. 把待退火的RNA oligo用DEPC水配制成200μM。溶解Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，混匀备用。 2. 如下设置退火反应体系：DEPC水30μlAnnealing Buffer for RNA Oligos(5X)20μlRNA oligo A(200μM)25μlRNA oligo B(200μM)25μl总体积100μl按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。如果用的PCR仪没有热盖，在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。3. 如下设置PCR仪进行退火反应：步骤温度时间说明190℃1分钟让oligo充分变性2每5秒下降0.1℃，降至25℃约60分钟退火34℃长时间保持暂时存放注1：每5秒下降0.1℃，降至25℃的程序设置，以Bio-Rad的T100为例为：1. 90℃, 2:00; 2.90º, 0.05, -0.1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 650X; 4. 4℃, ∞。注2：如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能，也可以设置为每60秒下降1℃。程序设置以Bio-Rad的T100为例为：1. 90℃, 1:00; 2.90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。注3：如果条件有限，也可以将水浴锅加热至90℃，把PCR管放在水浴锅中，或者把煮沸的热水加入到保温杯或保温瓶中，待水温降到90℃时放入PCR管。所用水量控制在1-2小时内自然降温至25℃左右。此方法的退火效果可能会比使用PCR仪略差一些。4. 退火结束后可以直接用于转染细胞，也可以-20℃冻存备用。