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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光;-20°C储存;充氩
- 英文名:
Biotin PEG Maleimide
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
B163348-100mg
Biotin functionalized polyethylene glycol (PEG-Biotin) is an avidin or streptavidin binding PEG derivative that is used to biotinylate biomolecules or other material surfaces. Biotin can be easily detected by biotin/streptavidin binding assay and is widely used for molecule target detection.
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文献和实验肽片段。混合的样品用抗生物素蛋白亲和层析法分离。这些肽段还可以进一步通过反向毛细管液相色谱和MALDI-TOF或QTOF2质谱进行分析,质谱后得到的相差8Da 的同位素分子质量峰,这些峰的比率可以作为与原样品各个蛋白相关量的测量尺度, 如一对峰相差8 个质量数,则为同一种蛋白质, 由D0和D8 峰的相对强度进行相对定量。由于ICAT在化学结构上相同且在分子量上只相差8 个中子,所以在用MS 检测时相对量的可信性有所提高。同样的, LC-ESI-MS 也可根据重和轻肽段的相对量提供蛋白的定量信息
结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用牛血清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400 )层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备(1)透析除盐:蛋白质溶液内应除去多余的电解质,不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/L NaCl , pH7.0)透析。(2)去除蛋白质中的
时间:光照时间不应太长。如果核苷酸上标记光敏生物素过多,会因空间位阻而影响探针与靶序列的杂交。一般认为,每100~400bp标记上一个光敏生物素分子。此法适用于大于200bp的核酸片段的标记,小片段标记率不高。 (4)光敏生物素用量:光敏生物素的活性基团是碱基,反应中加量不能太多,否则会产生氮气泡。一般为1 μg DNA用1~2μg光敏生物素。 二、原位杂交 原位杂交(in situ hybridization)用特定标记的已知碱基序列核酸作为探针与组织、细胞中待检测核酸按碱基互补配对
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