津灵微量RNA提取和建库试剂盒

OxsenTM Ultra-low Input RNA Extraction & Library Prep Kit 是专为高通量测序平台(如 Illumina 和 MGI)设计的皮克级微 量建库方案，适用于从部分降解及低品质微量样本(如血清、血浆、唾液、尿液、肺泡灌洗液、FFPE)，及特征物质如 FFPE 游离核酸、细胞外囊泡、病原微生物中提取 RNA 并构建测序文 库。试剂盒包含了 RNA 提取、片段化、反转录、双链 cDNA 合成、 rRNA 去除以及文库扩增所需的所有试剂。

常规的 RNA 提取方法是通过 polyA 富集法或 rRNA 删除法提取 RNA 分子，但部分 RNA(如不带 polyA 尾的部分非编码 RNA 和不成熟的 RNA 分子)分子无法通过 polyA 富集法捕获，且 rRNA 删除法可能在微 量建库的过程中删除非 rRNA 分子。
本产品的反应体系经过优化，利用 AI 优化 rRNA 去除环节。兼具上述常规方法优点，生成数据再现性高， 能有效去除 rRNA 的同时保留足够多的生物信号，特别适用于微量文库构建。

本产品适用于低起始量和低质量的 RNA 样本，简化了末端修复和接头连接，且无需在建库前去除 rRNA， 即可获得高均一性和完整覆盖度的测序数据。优化的反应体系提高了文库转化效率，同时保留了 RNA 链 的方向性，能够生成链特异性的测序数据。建议按照产品说明书中的优化方案进行操作，避免更改反应组 分的用量和浓度，或使用其他替代产品，以确保获得最佳结果。

实验流程：首先从样本中提取总 RNA，并去除 gDNA，然后对 RNA 进 行片段化处理并引入引物，以便后续 cDNA 合成。接着，利 用逆转录酶合成第一链 cDNA，再通过 DNA 聚合酶合成第 二链 cDNA，形成双链 cDNA。随后，在双链 cDNA 的末端添 加接头序列和特定的 barcodes ，用于后续测序和数据分 析。最后，通过津渡生科自研 CLIP 技术去除 rRNA，以降低 背景干扰，提高测序数据的有效性，得到适用于 Illumina 和

性能对比：下图为不同 rRNA 去除方法制备文库，文库插入片段分布图。图 A、B、C 为血浆样本;D、E、F 为 0.25 ng 标 准品;G、H、I 为1 ng 标准品;J、K、L 为10 ng 标准品;津灵试剂盒中 mtrRNA 含量 ( A、D、G、F) 为1.2 %- 12 %;国外 T 公司产品 (B、E、H、K) 为3.8 %-15 %;国产某公司产品 (C、F、I、L)产品为3.8 %-24 %。