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文献和实验蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications,PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此,识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章,关于翻译后修饰Post
.93 g MOPS (Sigma M-1254) Dissolve in 80 ml ddH2 O, adjust pH to 7.5 with 1 N NaOH, and bring volume to 100 ml. 10X MOPS buffer : 400 mM MOPS, pH 7.5, 500 mM NaCl, 100 mM MgCl2 in double distilled water. 400 μl 1 M MOPS, pH 7.5 170 μl 3 M NaCl
基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
消化后,MALDI技术分析得到的肽指纹图谱。使用1-D SDS PAGE胶分离后的目标蛋白分别使用:无戊二醛的银染法(图左)和Zn2+-imidazol染色法(图右)进行染色。切胶后用胰蛋白酶进行消化,使用多孔 R2磁珠进行浓缩,DE-MALDI-RETOF-MS分析,得到胰蛋白酶肌动蛋白肽的质量及其S/N(斜体)比率。 本文由百泰派克生物科技整理编辑。未经许可,不得转载。 北京百泰派克公司采用高分辨率质谱平台技术,包括Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap
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