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文献和实验成单层的L929细胞用0.25%胰酶消化2~3min。除去消化液后,用10% FCS的RPMI-1640将L929细胞配成1×105/ml,加入96孔细胞培养板中,每孔100μl。2、取100μl不同稀释度的IL-1标准品和待测品,分别加入各孔中,每孔设3个复孔,置37℃,5% CO2温箱孵育56h。3、用PBS溶解MTT为5mg/ml,用0.22μm膜滤器除菌及杂质。4、上述培养体系取出后,每孔加入10μl MTT(5mg/ml),37℃继续培养4h。5、从每孔吸出100μl上清弃去,加酸化异丙醇或加
物附在盘片的表面上,结成一层生物膜,转动时,浸没在水中的盘片露出水面,盘片上的水中自重而沿着生物膜表面下流,空气中的氧通过吸收、混合、扩散、渗透等作用,随转盘转动而被带人水中,使水中溶氧增加,使生物膜中的微生物吸收和降解水中的有机物,水质得到净化。 生物转盘优点:①转盘本身可向水中增氧(近年来,转盘内增添了曝气管,增氧效果更佳),故水中溶氧充足。生物膜绝大部分为好氧性微生物,很少形成厌氧层。②有机物的负荷高,通常盘片上BOD5负荷高达10~20 g/m2·d。③占地
酶分离下来细胞后,用200目滤网过滤,待细胞自然沉降,得长杆状细胞就是,好像不用分离纯化。 5、问:线粒体特异性的标记物有哪些? 答:可以用JANUS GREEN B(詹那斯绿)染,线粒体中的细胞色素氧化酶可以氧化其成蓝绿色。这是活体线粒体特异性染料。你的目的是否与此有关? 6、MTT法测细胞黏附率的问题: 问:不少文章提到在他们使用MTT法测细胞黏附率或黏附抑制率时,将细胞种入96孔板孵育前,都预先按分组要求,将细胞与干预药物先一起加入试管中或24孔板中孵育30min,然后再种入96孔
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