- ￥198
- 沃比森WISSEN
- 中国
- VS17846-250g
- 2026年01月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
24个月
- 英文名：
Beijing Wissen Technology Co., Ltd
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
NULL
- 规格：
VS17846-250g
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文献和实验，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null) 融合，并表达适当的 sgRNA，可靶定任何 dsDNA 序列，而 sgRNA 的末端可连接到目标 DNA，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA。这一套系统为生物体的研究和改造带来巨大潜力。有什么用？通过 Cas9 蛋白形成 DNA 双链的断裂，然后细胞通过 NHEJ 的修复会造成 INDEL 效应 (insertion and deletion
实验原理 TP53 是重要的抑癌基因。在多种肿瘤中都能发现 TP53 基因突变及功能丧失。我们将针对 TP53 基因设计的靶点构建到 pCas9/gRNA1 载体，转染 293T 细胞，构建了 TP53 基因敲除 293T 细胞系。 1、本实验基因敲除原理：pCas9/gRNA1 载体表达 gRNA 和 Cas9 蛋白。将靶点序列克隆到 pCas9/gRNA1 载体上，gRNA 将诱导 Cas9 蛋白对靶点 DNA 进行切割，造成 DNA 断裂。细胞通过邻端连接
生长面积对培养液体积和转染试剂用量进行相应调整。 1、转染前 24 小时，将 293V 细胞以 4-5×106/10 cm 平皿密度接种，加入 10 ml 293V 培养基 37℃，5% CO2 培养。细胞转染前密度应达到 80-90%。 2、漩涡震荡混匀 Polyfect-V 转染试剂。 3、准备 2 个离心管，按以下顺序分别制备质粒和转染试剂稀释液。 离心管 1（质粒 DNA） 离心管 2（转染试剂） Cas9 慢病毒载体 5 μg
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