- ￥297
- 沃比森WISSEN
- 中国
- VS11353-250g
- 2025年12月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
24个月
- 英文名：
Beijing Wissen Technology Co., Ltd
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
NULL
- 规格：
VS11353-250g
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文献和实验手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具，它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括：Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止，CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应（DSB）被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
，期限1个月。 步骤： · 取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，接种于液体培养基中，置于37℃培养二周，观察是否有混浊或是pH值改变之情形。培养一周及二周后，分别取0.1 ml液体培养液涂在agar plate上，将其倒放置于37℃厌氧箱培养，培养至少3星期，持续观察是否有支原体之菌落出现。 · 另取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，涂抹在agar plate上，37℃厌氧培养3星期，持续观察是否支原体菌落出现。 · 另作正负反应对照组，正反
，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null) 融合，并表达适当的 sgRNA，可靶定任何 dsDNA 序列，而 sgRNA 的末端可连接到目标 DNA，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA。这一套系统为生物体的研究和改造带来巨大潜力。有什么用？通过 Cas9 蛋白形成 DNA 双链的断裂，然后细胞通过 NHEJ 的修复会造成 INDEL 效应 (insertion and deletion
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