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文献和实验mg/ml Proteinase K in TBS (store up to 1 year at -20 C) 1 ml 100mM PMSF or 0.5 ml 250 mM Pefabloc Final concentration For 50ml Lysis Buffer 10mM Tris (pH 8.0) 500μL 1
混合斑的检测,剪碎后放入5ml小烧杯中,加入3ml纯水、300μl 10% SDS及150μl 5mg/ml 的PK酶,用牙签搅拌后,放入37℃水浴6小时以上(最好过夜)。(2)将水浴好的检材移入1.5ml离心管(检材载体用一次性注射器挤压后去除),13,000rpm 离心3分钟,去上清,每管加1.4ml 纯水,振荡,13000rpm 离心3分钟。洗三次后,移入0.5ml离心管中,13000rpm离心3分钟,弃上清。(3)向沉淀物的离心管中加入200μl 5%的Chelex-100(可根据检材量
2的血斑,加到0.5ml的离心管中,加入500μl纯水,剧烈振荡,室温放置15分钟。13,000离心3分钟,去上清。(可用纯水反复洗至无色,载体 不需去除,始终留在离心管中。) (2)以下步骤同全血的提取方法。 (三)混合斑 (1)取适量含有混合斑的检测,剪碎后放入5ml小烧杯中,加入3ml纯水、300μl 10% SDS及150μl 5mg/ml 的PK酶,用牙签搅拌后,放入37℃水浴6小时以上(最好过夜)。 (2)将水浴好的检材
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