30 16 2092赛默飞30mm 针筒过滤器, 玻璃纤维/

各类western转膜条件

）： 蛋白分子量：16 KDa WB用膜类型、孔径：0.2 um PVDF膜 转膜方式（恒压、恒流）：0.2 A恒流 转膜时间：65 min 转膜设备：湿转 Bio-Rad   蛋白来源：成纤维细胞 蛋白名称（可保密）： 蛋白分子量：28 KDa WB用膜类型、孔径：0.2 umPVDF膜 转膜方式（恒压、恒流）：0.25 A恒流 转膜时间：60 min 转膜设备：湿转 Bio-Rad  

v468 Chapter 2 Wnt活性蛋白分离及应用

dishes (e.g., Corning® CellSTACK®). 6. CO 2 incubator and biosafety cabinet. 7. Filter bottle, 0.5–1 L, 0.2-μm pore size (Corning or equivalent). 2.2. Preparation of Wnt3A CM for Fractionation 1. 20% (v/v) Triton X-100. 2. 1 M Tris-HCl, pH

Western Blot详解－常见的问题指南（二）

纤维素膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。因此，我们通常用0.45μm和0.2μm两种规格的硝酸纤维素膜。大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如果用0.45μm的膜就会发生“Blowthroμgh”的现象。从膜的质地上来看，最重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。硝酸纤维素膜的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关，市场上有些硝酸纤维素膜通常会还有大量的醋酸纤维素，因而降低了蛋白