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- Thermo Fisher
- 60180-560
- 2025年08月27日
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文献和实验for four hours in the presence of colcemid (3.125 µl of 10 µg/ml colcemid (Gibco # 15212-012) per ml of medium). 2ml per 35 mm and 4ml per 60 mm. 3) Remove media and place it in a 15 ml Falcon tube. Wash with trypsin, and trypsinize with 1.5 ml trypsin.
, without CaCl2 , MgCl2 , MgSO4 , 500ml bottle, Store at 4° C. Glacial Acetic Acid: FISHER SCIENTIFIC cat# A38-500. Acetic acid, Glacial ACS (Aldehyde free), 500ml bottle. L-Glutamine: GIBCO cat# 25030-032. L-Glutamine solution 100X (200mM), 20ml bottle
, 100 mM NaCl，0.5% Triton X-100，调pH值至8.5-9.0备用;用前加入100 μg/ml 溶菌酶，1μl/ml 的蛋白酶抑制剂PMSF。该裂解液用量为10-50ml 裂解液/1g湿菌体。 2、将40ml 菌液在12000g，4℃下离心15分钟收集菌体，沉淀用PBS 悬浮洗涤2遍，沉淀加入1ml裂解液悬浮菌体。 3、超声粉碎，采用300w，10s超声/10s间隔，超声20min，反复冻融超声3次至菌液变清或者变色。
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