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- 2025年07月16日
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文献和实验Ice· Micropipettes,0.5 to 1.0 µl,10 to 100 µl,100 to 1000 µl·Sterile pipette tips·Disposable gloves,safety glasses,and lab coats·Microcentrifuge,for 1.5 ml and 0.2 ml PCR (adapter)microcentrifuge tubes·Sterile deionized water·Template DNA·Primers
-HCl，1mM EDTA，调pH值至8.0备用。 2、菌液于4℃条件下15000g离心15min收集菌体;用1ml 含有5mM MgCl2 的PBS洗涤3次，最后于4℃条件下15000g离心15min收集菌体。 3、菌体沉淀加入1ml冷提取液，于4℃条件下放置2h，17000g离心10min，去除沉淀取上清。 4、将上述上清中的Triton X-114含量增加到2%，再加入20mM的CaCl2抑制部分蛋白酶活性，37℃条件下放置10min使其分层。室温下1000g离心10
Buffer (0.28 M TES (free acid), 0.12 M HCl, 0.05 M DTT, 0.08 M MgCl2 , 0.2 M NaCl), TES = N-tris [hydroxymethyl]methyl-2-aminoethane sulfonic acid, MW 229.2 Stop solution 1 N NaOH (freshly prepared from 10 N Stock) [35 S]dATP (1000 Ci / mmol
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