05 09 0968赛默飞0.1ml 微量内插管, 29 x

分子实验方法10:测序技术

7 DNA 聚合酶 2.0ml 混合充分（注意不得产生气泡），置于室温5-10分钟。 如果在电泳时碰到带压缩问题，则dITP 混合物的效果优于dGTP混合物，dITP混合物的使用方法与dGTP混合物的使用是相似的。 [注意] 1、稀释时应将所有的溶液预先混合完全后再加入酶液。 2、在第（3）步的过程中，如果反应中有几次冷却，保温的时间过长或温度太高的话，则会使测序反应短于100个碱基。 3、链终止反应： （1）取4支eppendorf管分别标上G，A，T，C。 （2）每个

分子实验方法10: 测序技术

钠（Na2CO3)溶于2升超纯水中，使用前加3ml 37% 甲醛和 40ml硫代硫酸钠溶液（10mg/ml)。（10）95%乙醇。（11）0.5%冰乙酸。（12）Sigmacote (Sigma CAT. #SL-2)。五、操作步骤： 成功地使用银染测序系统需要对提供的操作方法进行仔细考虑。银染不如放射性检测法灵敏，而需要更多的模板量，此外，也不可能通过延长X-光胶片曝光时间的方法增加信号强度。因此，请使用推荐的DNA 模板量，每次均使用所提供的对照检查系统的可靠性，并且注意如下几点

分子实验方法10: 测序技术

　　[注意] 1. 用过的凝胶可在水中浸泡后用剃须刀片或塑料刮刀刮去。玻璃板须用去污剂完全清洗。或者凝胶用10% NaOH浸泡后除去。为防止交叉污染, 用于清洗短玻璃板的工具必须与清洗长玻璃板的工具分开, 如果出现交叉污染, 以后制备的凝胶可能撕裂或变得松驰。 　　2、凝胶的制备： 　　（1）玻璃板经粘合硅胶和Sigmacote处理后，即可固定玻璃板。该方法是用0.2mm或0.4mm厚的边条置于玻璃板左右两侧，将另一块玻璃板压于其上。在长玻璃板的一侧插入鲨鱼齿梳平的一面