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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
消化后,MALDI技术分析得到的肽指纹图谱。使用1-D SDS PAGE胶分离后的目标蛋白分别使用:无戊二醛的银染法(图左)和Zn2+-imidazol染色法(图右)进行染色。切胶后用胰蛋白酶进行消化,使用多孔 R2磁珠进行浓缩,DE-MALDI-RETOF-MS分析,得到胰蛋白酶肌动蛋白肽的质量及其S/N(斜体)比率。 本文由百泰派克生物科技整理编辑。未经许可,不得转载。 北京百泰派克公司采用高分辨率质谱平台技术,包括Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap
收到的能量较少。这样可以减少紫外线对核酸的损害,但也会降低凝胶条带的信号。另一方面,透射仪器可为条带提供更高的信号,但由于辐射接近凝胶,会增加紫外线造成的伤害。 图 5. 反射照明器和透射仪 b. 放射自显影法 在放射性核酸的电泳过程中,凝胶电泳后会暴露在 x 射线胶片上,这一过程即称为放射自显影法。条带辐射的强度可用光密度测定来定量。 参考文献 1.Stellwagen NC (1998) DNA Gel Electrophoresis. In: Tietz D (editor
Cell Metab:西京医院王琳教授团队报道非酒精性脂肪肝炎新靶点
,TRIM16 可抑制 JNK-p38 通路的激活。 图片来源:Thermo Fisher TRIM16 促进磷酸化的 TAK1 的蛋白酶体降解TRIM16 又是如何抑制 JNK-p38 通路激活的呢?为了确定 TRIM16 抑制 JNK-p38 通路的具体靶点,作者在肝细胞中过表达 TRIM16,并进行了免疫沉淀 - 质谱(IP-MS)分析。通过整合 IP-MS 和定量泛素组学的结果,作者筛选到 3 个 MAPK 通路成员,其中 TAK1(也叫 MAP3K7)已被证实在 NASH 进展过程中发挥关键
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