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文献和实验离 0.1-25 kb 范围内的核酸分子。聚丙烯酰胺形成的孔径较小,可用于分离小于1 kb 的核酸分子。某些情况下,可采用聚丙烯酰胺凝胶以获得片段小于 100 bp 的单碱基分辨率[1]。 表 1. 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶之间的差异 2. 准备标准品和样品 a .核酸标准品选择 当运行凝胶时,含有已知大小的核酸参照样品通常被称为标准品、标记或分子量标准,用于目的样品大小的估计。在为给定样品选择合适的分子量标准时,需考虑如下因素: Ladde 类型(例如 DNA 或 RNA),片段结构(例如单链或双链
载气旁路(分流、柱流量),使峰忽大忽小,造成无法定量。因此,除保证衬管初装时的密封性外,还要及时检漏和更换。当进样口温度超过400℃时,最好采用石墨密封圈。 (7)尾吹气路: 由于色谱柱内载气流量很小,载气进入检测器后会突然减速,使谱峰展宽。因此,在色谱柱出口与检测器之间安装辅助尾吹装置,使样品快速流过检测器,从而克服检测器的死体积,使峰形尖锐。 3、特点: (1)优点: 1)可用于浓缩样品。 2)样品不需要溶剂稀释,不存在溶剂的有害影响。 3)可注入较大
光猝灭。 常用的脱气方法比较: 氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。 加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染。 抽真空脱气法:易抽走有机相。 超声脱气法:流动相放在超声波容器中,用超声波振荡10-15min,此法效果最差。 在线真空脱气法:Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术,在线脱气,智能控制,无需额外操作,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系
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