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99
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赛默飞
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福州木辰
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文献和实验蛋白质翻译后修饰 (Protein translational modifications,PTMs) 通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。这些修饰包括磷酸化、糖基化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、脂质化和蛋白水解,几乎影响正常细胞生物学和发病机制的所有方面。因此,识别和理解 PTM 在细胞生物学和疾病治疗和预防的研究中至关重要。 看到一篇 Thermo Fisher的文章,关于翻译后修饰Post
: 1. 感受态种类与效率,尤其转化效率,一定要很高。效率越高转化成攻率越高。有的时候片段与载体已经连接成功了,只不过在转化时,自身空间结构较大,没有转进去。 2. 酶切反应:如果可以,请用thermo fisher的内切酶,无论单酶切还是双酶切,6 h足够了。takara的酶批次间稳定性经常有问题,而且长时间酶切,片段很容易切碎。 3. 4000+的片段先加A连接到T载体上,利用片段两端的酶切位点双切,回收后再连接载体。 4. 如果第3步还是不行,请尝试一下这个偏方
Systematic Evaluation of Skeletal Mechanical Function
Microcentrifuge (Fisher Scientific accuSpin Micro 17) Ashing oven (Thermo Lindberg Blue M
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