60300-446赛默飞HyperSep-96 孔C8 提取

总蛋白和膜蛋白提取方法

-HCl，1mM EDTA，调pH值至8.0备用。 2、菌液于4℃条件下15000g离心15min收集菌体;用1ml 含有5mM MgCl2 的PBS洗涤3次，最后于4℃条件下15000g离心15min收集菌体。 3、菌体沉淀加入1ml冷提取液，于4℃条件下放置2h，17000g离心10min，去除沉淀取上清。 4、将上述上清中的Triton X-114含量增加到2%，再加入20mM的CaCl2抑制部分蛋白酶活性，37℃条件下放置10min使其分层。室温下1000g离心10

Pierce推出更快更彻底的新品去垢剂

除>95%的蛋白提取和样品制备过程中所使用的去垢剂，而蛋白和多肽损失极少。此树脂适用于常用去垢剂的去除，如浓度在0.5-1%的SDS、Triton X-100、NP-40和CHAPS。目前有预装的离心柱和离心板形式，最多可处理100 µL样品。另外，您也可以购买HiPPR Detergent Removal Spin Column Kit，其中包含树脂浆和空的离心柱，便于您自己调整样品体积。 整个处理过程相当简单，仅需15分钟。首先是离心去除保存液，之后用缓冲液平衡树脂并离心，重复

最全面的MTT大汇总

药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可