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99
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赛默飞
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福州木辰
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文献和实验5minlysis buffer:urea np-40 ampholine 2-me pvp-40六、蛋白质样品制备秧苗蛋白质样品的提取按Davermal等(1986)的方法进行。100mg材料剪碎后加入10mgPVP-40(聚乙烯吡咯烷酮)及少量石英砂,用液氮研磨成粉,加入1.5 ml 10% 三氯乙酸(丙酮配制,含10mM即0.07%β-巯基乙醇),混匀,-20℃沉淀1小时,4℃,15000 r/min离心15 min,弃上清,沉淀复溶于1.5ml冷丙酮(含10 mMβ-巯基乙醇),再于-20℃沉淀1小时
为红色。而Y187 非Adenine 缺陷 菌株。所以菌落为白色。为了便于操作,一般先把Y187 菌影印到2XYPD 平板,然后再影印Y190 菌。 3)Mating 时应该设置阳性对照,以便监测Mating 情况是否良好。 2.5. 抽提酵母质粒 1) 膜检变蓝的阳性克隆用牙签涂布在SD/-Trp-Leu-His+30mM3-AT 平板上,约 2cm2,然后放置于30℃培养箱中培养3~4 天。 2) 取一Eppendorf 管,加入30μl 5u/μl Lyticase
若干个1.5ml试管,分别加入1 ml 10 nm胶体金; (2) 用25 mM K2CO3将pH分别调为3,4,5,6,7,8,9,10; (3) 取一96孔培养板,按pH从低到高分别将上述胶体金分别取100 ml加入孔中,重复三次; (4) 每孔分别加入3 ml浓度为1 mg/ml的纤维素酶,混合,室温下放置10-15 min; (5) 每孔分别加入20 ml浓度为10% NaCl溶液,混合,室温下放置10 min; (6) 观察胶体金颜色变化,记录保持红色的最低pH(X
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