40210-018823A赛默飞HYPERSILPREPOD

高效液相色谱柱

容量不足或不合适；　　8.重金属污染。 （3）如何解决峰形拖尾的问题 A．与化学有关的拖尾问题　　1.流动相中，加入30mM的三乙胺（用与碱性化合物）或醋酸胺（用与酸性化合物），未知化合物加醋酸三乙胺；　　2.如仍然拖尾，将三乙胺换为二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；　　3.降低进样量至 B．与色谱柱有关的拖尾问题　　1.如柱头处有强保留的样品组分积聚，反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲醇，加1%氢氧化铵混合液冲洗，正向柱可用甲醇冲洗。　　2.使用保护柱。 C．与HPLC系统有关的峰拖尾

【资源】蛋白纯化经验指南（）

时你们一般用多少柱床体积？10X够了吗？ 一般也就3-5个床体积吧，离子交换需要平衡体积大点也，10X足够了 101) 有个关于胰岛素精纯化的问题想向你请教，我已取得95%纯度样品。但杂质大于1%，进一步纯化，用什么柱子，具体操作又怎样做呢，谢谢赐教。 我知道，我好象回复过，你用反相硅胶10um的柱子1.0X25cm或者2.2X25cm的柱子做制备，这样可以达到99%以上的纯度，别的方法很难做到你需要的纯度，此外胰岛素也可以用等电点沉淀的办法去掉一些杂质。 HPLC制备你可以参考