40005-059270XL赛默飞HYPPREPXL BDS

RAPD和ISSR技术

2O 五、操作步骤： 1. 在25ul反应体系中,加入(1tube)(可以混合多管后分装) 　　　　模板DNA（5Um） 4ul (50ng) 　　　　随机引物(5Um) 2ul (约5pmol) 　　　　10xPCR Buffer(1*) 2.5ul 　　　　MgCl2 (25Mm) 2.5ul 　　　　dNTP(1Mm) 2.5ul 　　　　Taq酶 1单位（U） 0.2ul 　　　　加ddH2O 至 25ul   ()为原浓度 　　混匀稍离心, 加一滴矿物

液相色谱的问题解决：方法开发，峰形不正，干扰峰

，离子对色谱法是可取的，离子交换色谱法也是可行的，但我选择了从一种较为传统的技术开始。通常我喜欢使方法简洁一些。方法越是简单，引出的问题也就越少。因此，我从反相色谱法开始研究，它使用低pH值的流动相。（如果你决定用离子对或离子交换色谱法，在本节的末尾部分我就这两种方法如何进行添加了一些论述。） 　　从15或25cm×4.6mm，5um的C-8或C-18色谱柱开始。我比较喜欢用新型的碱灭活硅烷作为柱填料，而不喜欢旧型的色谱柱，因为碱灭活硅烷对拖尾较不敏感，并且在较宽的pH范围内稳定。为了在离子

液相色谱的问题解决

用离子对或离子交换色谱法，在本节的末尾部分我就这两种方法如何进行添加了一些论述。）     从15或25cm×4.6mm,5um的C-8或C-18色谱柱开始。我比较喜欢用新型的碱灭活硅烷作为柱填料，而不喜欢旧型的色谱柱，因为碱灭活硅烷对拖尾较不敏感，并且在较宽的pH范围内稳定。为了在离子抑制的环境下操作，流动相的pH值应低于酸的pKa1-1.5个pH单位。苯二甲酸的第一个pKa 为2.9，则需要在pH=1.4-1.9的环境下操作。一般情况下，除非你知道色谱柱在什么环境下是稳定的，否则我们应该尽量