- ￥1800 - 3800
- 华尔纳生物
- WN-63230
- 武汉
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
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- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
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- 供应商：
武汉华尔纳生物科技有限公司
- 库存：
999
- 英文名：
狗心肌成纤维细胞永生化 （免疫荧光鉴定）
- 生长状态：
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- 年限：
5
- 运输方式：
快递
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
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- 免疫类型：
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- 相关疾病：
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- 组织来源：
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| 产品简称 | |
| 商品货号 | WN-63230 |
| 中文名称 | 狗心肌成纤维细胞永生化免疫荧光鉴定 |
| 种属 | 狗 |
| 组织来源 | 正常心脏组织 |
| 传代比例 | 1:2传代 |
| 简介 | 心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官，主要功能是提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能，心脏中，心肌成纤维细胞约占正常心肌组织细胞总数的60%-70%，是心脏中非心肌细胞的主要组成部分，广泛存在于心脏组织中，包围心肌细胞，连接心肌细胞间质，与缺血性心脏病、炎症、肥大、梗死等病理状态密切相关。 |
| 形态 | 长梭形细胞样 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 细胞检测 | 纤维连接蛋白（Fibronectin）免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定，细胞纯度可达90%以上，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
| 倍增时间 | 每周 2 至 3 次 |
| 换液频率 | 2-3天换液一次 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 基础培养基500ml；生长添加剂5ml；胎牛血清50ml；双抗5ml |
| 备注 | 狗心肌成纤维细胞永生化细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
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文献和实验时间：我师兄曾经告诉我2hr，现在我觉得90min已经很好了。 4、细胞可以先用台盼蓝测定存活率。 5、鉴定：在倒置显微镜下观察，细胞呈梭形、多角形，细胞质透明，细胞核大，呈椭圆形，常含有2－3 个核。IHC可以用I抗体（动物抗人B3、抗波形蛋白、抗血管平滑肌肌动蛋白）其余基本按IHC的步骤来。 丁香园网友googles的观点： 1、用0.05或0.08%的胰酶消化成年大鼠心脏, 效果欠佳, 我是用0.25%的浓度, 分次消化, 6-7次后心
、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA
固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min，1 × PBS 浸洗玻片 3次，每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）, 1 × PBS 浸洗玻片 3 次，每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS，在玻片上滴加 5% 的正常血清（与二抗种属来源一致或相似），室温封闭 1 h
