链霉亲和素修饰磁性微球

链霉亲和素修饰磁性微球产品说明

1、产品介绍

链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。采用蛋白偶联技术将SA 共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。

2、产品特点：

1.   粒径：常规1μm、2μm，并可根据客户的特殊要求定制粒径

2.   粒径高度均一，批间差CV＜5%，保证稳定可靠的性能

3.   多种磁性微球类型：羧基（COOH）、对甲苯磺酰基（Tosyl）、链霉亲和素（Streptavidin，SA）等满足不同的应用场景

4.   高稳定性，长时间存储后不会出现氧化变色和磁核泄露现象

5.   超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间，增加样本回收效率。

6.   良好的悬浮性能、分散性和重悬性

7.   良好的物理化学稳定性，保障重复性效果

3、产品列表：

如您所需的微球表面基团在上表中未列出，请联系您的客户服务代表进行定制。

由于粒径和浓度的不同，产品的价格也会有所差异。因此，具体的价格信息将由我们的客户服务代表根据您的需求进行详细解答。

 

4、结合生物素化分子操作流程

1、使用前准备

1.1缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH

1.2 Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH7.5），1 mM EDTA，1M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20

1.3 Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA

1.4化学发光Washing buffer：用户根据需求配制洗液，使用时平衡至室温

1.5漩涡振荡器

1.6旋转混合仪

1.7移液器及吸头

1.8合适的离心管

2、结合生物素化核酸

2.1.     将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2 倍，使磁珠饱和。

2.2.     加入1mL Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。备注：当步骤2.1 取用磁珠体积大于1 mL 时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。

2.3.     重复“步骤2.2”一次。

2.4.     加入500μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。

2.5.     磁性分离，将上清液转移至新的离心管。

2.6.     按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。

2.7.     根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。

2.8.     用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量（（反应前浓度-反应后浓度）× 反应溶液体积。）

2、结合生物素化抗体/蛋白操作流程

3.1将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。3.2加入1mL Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。备注：当步骤3.1 取用磁珠体积大于1 mL 时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。

3.3重复“步骤3.2” 两次，共洗涤三次。

3.4加入1mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。

3.5磁性分离，将上清液转移至新的离心管。

3.6按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。

3.7根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。

3、磁微粒化学发光免疫诊断操作流程

4.1调整磁珠至合适浓度（建议0.2-0.8 mg/ml），将磁珠置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取50 μL磁珠至96孔板中，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。

4.2每孔加入100 μL生物素化捕获抗体，充分震荡重悬磁珠，37°C恒温箱中孵育15min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。

4.3每孔加入200 μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。4.4每孔加入50 μL待测物标准品或待测样本，充分震荡重悬磁珠，37°C恒温箱中孵育15 min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。

4.5每孔加入200μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96 孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。4.6每孔加入100 μL酶标记抗体，充分震荡重悬磁珠，37°C恒温箱中孵育15 min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。

4.7每孔加入200 μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96 孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。4.8每孔加入150 μL的底物液，充分震荡重悬磁珠，避光孵育5 min。

4.9将96孔板放入化学发光仪读数，并进行相应数据处理。

5、注意事项:

1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。

2. 为减少磁珠损失，每次磁性分离的时间应不少于1min。

3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。

4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管，避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。

5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。

6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍，以使磁珠饱和。

7. 如需生物素与SA磁珠分离，可采用：方法一：0.1% SDS，煮沸5 min；方法二：pH=8.2，含95%甲酰胺的10 mM EDTA 中，65°C 5 min 或90°C 2 min。脱落率95%。

8.本产品仅供研究使用。