4-3-氯-4-甲氧基苄胺基-2-甲巯基-5-乙氧羰基嘧啶&

DNA甲基化研究方法的回顾与评价

性结合，对DEAE膜上的荧光素进行扫描得到5mC的水平，其荧光素强度与5mC水平成正比。Oakeley等1997年[23]报道了这种方法。这种方法需要精密的仪器。 2.1.4 氯乙醛法 Oakeley等1999年[24]首先描述了这种使用氯乙醛和荧光标记的方法。首先，将DNA经重亚硫酸盐处理使未甲基化的胞嘧啶全部转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变（Frommer等1992年）[25]，然后经过银或色谱柱去除DNA链上的嘌呤，再将样品与氯乙醛共同孵育，这样5mC就转变为带有强荧光的乙烯胞嘧啶

植物质膜蛋白的提取和溶解

的溶解步骤 [18 ] ( 见第 12 章），并且表达丰度低。本章描述了从模式植物拟南芥的根和叶悬浮细胞中纯化 PM 的方案，得到能用于蛋白质组学分析的可溶性 PM 蛋白。水通道蛋白是含有 6 个跨膜 α-螺旋 [ 19~22] ，26~35 kDa 的疏水性质膜镶嵌蛋白（PIP ) ，被用来作为评估相关的提取及溶解方案的对照蛋白质。2. 材料 2.1 生物材料 ( 1 ) 拟南芥属（Heynh.) 植物（生态型为 Wassilewskija 或 Columbia ) , 培养

常用溶液的配制

29.224mg 巯基乙醇 0.07ml 甘油 297ml 蒸馏水 加至1000ml 用lNHCl调pH至7.2室温保存。 (二)2％Triton X一100溶液 量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。