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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
Methyl 1-methyl-1H-indazole-3-carboxylate
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- CAS号:
109216-60-6
- 规格:
1g
产品中文名称:1-甲基-1H-吲唑-3-羧酸甲酯
产品英文名称:Methyl 1-methyl-1H-indazole-3-carboxylate
CAS号:109216-60-6
纯度级别:98%
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文献和实验: 取16.28硅胶H, 1.8 g MN30OUV 254纤维素,0.5外挟甲基纤维素钠(离心去除悬浮物)90ml,于匀浆器中匀浆5分钟,速度以浆液不溅出为度,抽气,均匀涂布在6块20× l 0 cm或4块20×1 5cm的平整清洁的玻板上。 (2)薄层分离:称取25X103nM (1nM二10-9 M)A ,G ,C ,T ,U ,盛于不同容器中,再分别称取同样量的上述各碱基混合于一个容器,各加Im l水,1滴12N NaOH 液助溶,后加1滴浓HCl,用0.1 N HCI稀释到5m
细胞凋亡试验常用的方法(MTT法、荧光法、DNA琼脂糖凝胶电泳法与流式细胞仪检测法)
100ul/孔SDS-HCl终止反应,于37℃存放过夜。用酶标仪在A570波长下测吸光度值,按下式计算抑制率。抑制率(%)=(1-试验组平均吸光度值/阴性对照组平均吸光度值)x 100%。(二)荧光法:选用上述最佳浓度作用于肿瘤细胞,培养细胞48h后,收货细胞用PBS洗2-3次后用0.4%多聚甲醛室温下固定30min。弃去固定液,并用PBS洗2次后,用1%Triton X-100作用4min加入适量的0.5mg/L DAPI荧光染色60min,用PBS冲洗3次,取10ul滴片,干燥后于荧
。常使用的甲基化敏感的限制性内切酶有HpaⅡ-MspⅠ(识别序列CCGG)和SmaⅠ-Xmal(CCCGGG)等。由于后者识别的碱基数相对较多,其碱基序列在体内出现的概率相对较低,所以以前者即HpaⅡ-MspⅠ更常用。其中HpaⅡ和MspⅠ均能识别CCGG序列,然而当序列中的胞嘧啶发生甲基化时,HpaⅡ不切割,利用HpaⅡ-MspⅠ的这种属性处理DNA,随后进行Southern或PCR扩增分离产物,明确甲基化状态[12][26]。这是一种经典的甲基化研究方法,其优点是:相对简单,成本低廉,甲基
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