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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
4-Methylphenyl 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-1-thio-β-D-glucopyranoside
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- CAS号:
28244-94-2
- 规格:
10g
产品中文名称:4-甲基苯基 2,3,4,6-O-四乙酰基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷
产品英文名称:4-Methylphenyl 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-1-thio-β-D-glucopyranoside
CAS号:28244-94-2
纯度级别:98%
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文献和实验的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说,我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析,随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13,24,25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基:含 100 μg/ml 氨苄青霉素,15 μg/ml 卡那霉素,2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液:300 mmol
液):17 mmol/L KH2PO4,72 mmol/L KH2PO4,用 0.2 μm 孔径的滤膜过滤灭菌。 ( 8 ) 硫胺。 ( 9 ) 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG;MBI Fermentas,St.Leon- Rot,Germany) 。 ( 10 ) MultiScreenHTS 真空歧管(Millipore,Eschborn,Germany) 。 ( 11 ) NiNTA 琼脂糖(NTA:氮川三乙酸镍;Qiagen) 。 ( 12 ) 变性裂解缓冲
( 1 ) PRSETB 细菌表达质粒(Invitrogen ) : 用于 Ni-次氮基三乙酸(NTA ) 琼脂糖蛋白纯化的 His-tag;用于选择的氨苄青霉素和用于诱导蛋白质表达的异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG )。 ( 2 ) pcDNA3 哺乳动物瞬时表达质粒(Invitrogen ) : 巨细胞病毒启动子和用于细菌选择的氨苄青霉素抗性基因。 2.2 生物化学和生物物理鉴定 ( 1 ) Luria-Bertani ( LB ) 培养基:10 g 胰蛋白胨,5 g 酵母
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