(3,3-二氟环丁基)甲醇&681128-39-2

免疫印迹实验相关原理介绍

免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射，生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl

综述：脑组织透明成像技术

在溶剂中一周，就可以得到透明的脑组织，但是组织膨胀率高达 10%-30%。尿素溶液处理固定的脑组织，通过水合作用使组织透明，但相应的组织略膨胀，后续用 ScaleA2 溶液继续处理，ScaleA2 溶液包含 4M 尿素，10%（wt / vol）甘油和 0.1%（wt / vol）Triton X-100 组成。甘油可以防止过多的水合作用并使组织扩张最小化。在 ScaleA2 溶液中孵育完整的固定小鼠大脑，孵育时间 2 周以上可充分清除脑组织。在有图案的背景下或通过 532 nm 激光的穿透，透明

蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)

分离；通过电流将凝胶中的蛋白质转移到聚偏二氟乙烯膜上；利用抗体（一抗）与抗原发生特异性结合的原理，以抗体作为探针钓取目的蛋白。值得注意的是在加入一抗前应首先加入非特异性蛋白，如牛血清白蛋白对膜进行“封阻”而防止抗体与膜的非特异性结合。 经电泳分离后的蛋白往往需再利用电泳方法将蛋白质转移到固相载体上,我们把这个过程称为电泳印迹。常用的两种电转移方法分别为: 1.半干法: 凝胶和固相载体被夹在用缓冲溶液浸湿的滤纸之间,通电时间为10分钟~30分钟。 2.湿法：凝胶和固相载体夹心浸放在转移