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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
MES SDS Running Buffer
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- CAS号:
RH-00697
- 规格:
250ml
产品中文名称:MES SDS电泳缓冲液
产品英文名称:MES SDS Running Buffer
CAS号:RH-00697
纯度级别:20X
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文献和实验10孔梳子插入玻璃板之间。确保无气泡产生(图 7)。让浓缩胶聚合60分钟。 •在900 ml蒸馏水中稀释100 ml 10 X缓冲液,并添加SDS, 制成最后浓度为3.5mM的 SDS-PAGE电泳缓冲液。 •将两个翼型扳手均匀施力掰开,从灌胶模具中取出凝胶三明治夹。通过灌胶模具背后留的两个大孔,轻轻向上将三明治夹推出(图 8)。 •将电极放入垂直电泳槽内。贴着电极壁,将凝胶三明治夹垂直方向插入电极中(图 9)。 •把凝胶三明治夹置于合适的位置后,关闭电极门(图10)。
(十二烷基硫酸钠)50 mM Tris-HCl pH 8.0蛋白酶抑制剂Tris-HCl 缓冲液20 mM Tris-HCl pH 7.5蛋白酶抑制剂●电泳、转膜、封闭缓冲液Laemmli 2× 缓冲液/上样缓冲液4% SDS10% 2-巯基乙醇20% 甘油0.004% 溴酚蓝0.125 M Tris-HCl测定 pH 并调节至 pH 6.8。电泳缓冲液(Tris-甘氨酸/SDS)25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸0.1% SDS测定 pH,pH 应为约 8.3。必要时进行调节。转膜缓冲液
梯度(两个孔)取其平均值减去空白后制作标准曲线得到曲线公式。测得的样品的 OD 值(三个孔)取其平均值按标准曲线的公式运算得到蛋白浓度,按 50 μg/上样孔的标准来计算上样量,算法为:上样量= 50/蛋白浓度。注:所有得到的 OD 值必须减去背景(标曲中空白孔的 OD 值)后再计算。 样品处理: 蛋白样品:5×SDS 上样缓冲液按照 4:1 比例混合沸水浴 10 min 左右。浓度过高的样品可用 PBS 稀释后再煮样。样品煮好后 -20 ℃ 保存待用(可保存半年),样品长期保存须置于 -70
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